尿蛋白定量测试盒 （CBB法）

尿蛋白定量测试盒 （CBB法）

【产品简介】

尿蛋白检测，所使用的考马斯亮蓝（CBB）方法,是日常实验常用的蛋白定量检测手段。健康人体尿液中蛋白浓度极低，普通检测手段难以检出；当机体出现病变或生理异常时，尿液蛋白含量会异常升高，即为蛋白尿。游离态的考马斯亮蓝 G250 呈现红色，在465nm 处为其吸收峰值；该染料与蛋白质相结合后会转为青蓝色，结合复合物的最大吸收波长偏移至 595nm。显色深浅和蛋白含量成正比，据此可完成定量分析。本试剂盒同样适用于血清、血浆、组织及细胞样本的蛋白含量测定。

【检测原理】

酸性环境下，考马斯亮蓝 G-250 染料存在棕红色游离形态，与尿液中蛋白质碱性氨基酸残基特异性结合后，空间结构发生改变，转变为蓝色络合物。该结合产物在 595nm 波长处具备最大光吸收峰值，吸光度数值与蛋白浓度呈良好线性正比关系。通过分光光度计测定吸光度，对照标准曲线即可精准换算出尿液样本中的蛋白含量，实现定量检测。

【样本准备】新鲜尿液 2000 r/min 离心 5 min，吸取上清待测。样本含量过低时可适当加大取样量（如上样 20ul ，同时标准品应稀释 2 倍后和样本量体积一致，计算时标准品浓度除以相应的稀释倍数后再代入计算），而 CBB 应用液量不变。

【测定步骤】

(1) 按照下图所示，取96孔板，用 10 μL 不同浓度的双蒸水，标准液，尿液样本，加入到对应的孔中。

(2) 再加入250ul CBB应用液到对应的孔中。 

(3) 酶标仪上振荡 10 s，室温静置 10 min，595 nm，测各孔的 OD 值。

【注意事项】

1. 测定管 OD 值过高时（测定 OD 减去空白 OD 后的差值比标准 OD 减空白 OD 的差值的 2 倍还大的）要将样 本用生理盐水作一定稀释后（稀释后选择测定 OD 值接近标准 OD 值对应的稀释倍数）再测。

2. 实验前请仔细阅读说明书并调整好仪器，严格按照说明书进行实验。

3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

【运输储存】
冰袋运输，按照标签分别于2-8度和-20度储存，有效期 3 个月。

尿蛋白定量测试盒 （CBB法）