溴化氰活化4B琼脂糖凝胶产品说明书

溴化氰活化4B/6B琼脂糖凝胶是一种活化中间体填料，它是通过溴化氰和琼脂糖上面的羟基反应生成活化的氰酸酯基团。蛋白质、多肽、氨基酸等可以偶联到溴化氰活化4B/6B琼脂糖凝胶上。

它具有以下优点：

偶联条件温和，效率高；可偶联含有氨基的配体，应用范围广。

产品指标

使用注意事项：
    溴化氰活化4B/6B琼脂糖凝胶是以添加剂的形式冻干处理得到的。这些添加剂在填料螯合所需的配体前必须在低pH（pH 2–3）条件下进行清洗。活化后的活性基团也应该使用低pH值（pH值2–3）保存，而在高pH值则会出现降解。
    称取所需量的冻干粉(1 g冻干粉可获得3~5ml终体积的填料)，使用1mM HCl溶胀。填料会很快膨胀，再用1mM HCl在玻璃砂芯漏斗（G3）中进行清洗15min。每克冻干粉添加约200ml 1mM的HCl溶胀，实际可以分次添加。
 

一般配体偶联的过程如下：
（1）将所需要偶联的配基溶解到 pH 8.3含有0.5mol/LNaCl的0.1mol/LNaHCO₃ 缓冲溶液中，加入溶胀好的溴化氰活化4B/6B琼脂糖凝胶。
（2）在室温中搅拌反应2~4小时或者在4℃下过夜反应。
（3）反应*后，用5倍反应体积的偶联缓冲液洗涤掉其中多余的配体，10倍体积的水洗。
（4）将反应完洗涤过的凝胶悬浮到水中，加入乙醇胺（1mol/L）或者pH8.0的Tris-HCl缓冲液，在常温少搅拌反应2小时，以消除残余活性基团。
（5）用含有0.5mol/LNaCl的0.1mol/L醋酸盐缓冲液（PH 4.0）和含有0.5mol/LNaCl的0.1mol/L Tris-HCl缓冲液（PH 8）交替洗涤，至少重复以上循环洗涤3次。用10倍柱体积的PBS洗涤。