小鼠褪黑素（MT）ELISA检测试剂盒检测原理

信帆生物主营产品: 质控品，干扰物质，抗体抗原，elisa试剂盒，动物血制品，生化试剂盒等。实验代做服务：HE染色/特殊染色/技术服务、免疫组化实验服务、Western blotting实验服务、RT-PCR实验技术服务,QPCR(荧光定量PCR）、酶联免疫ELISA、生化测试、液相气相检测等

产品名称：小鼠褪黑素（MT）ELISA检测试剂盒

英文名称：Mouse MT Elisa Kit

货号：XFM21208

规格：48T/96T

储存条件：2-8℃

有效期：6个月

用途：用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中小鼠褪黑素（MT）的含量。

检验原理

试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生物素标记MT，纯化的抗MT抗体包被微孔板，在竞争抑制反应中，一定量的固相抗体与生物素标记MT及非标记抗原（校准品或标本）进行抑制竞争反应，抗体与生物素标记的MT结合量受非标记抗原量所抑制，非标记抗原量多,抗体与生物素标记的MT结合就少，反之结合就多；反应平衡后，形成固相抗体-生物素化MT，再加入酶标记的亲和素，形成固相抗体-生物素化MT-酶标-亲合素复合物。经加底物显色后，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）。随着MT浓度的升高，OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点，对血清中MT的减少或升高有可靠的检出性能。

产品性能指标

1. 外观和物理检查:试剂盒应组分齐全，内外包装均应完整，标签清晰，液体试剂无渗漏。各组分装量不少于表1中要求。

2. 线性: 用四参数Logistic曲线拟合（4-pl），在2.5 pg/mL – 80 pg/mL范围内，剂量-反应曲线相关系数（r）的绝对值应不低于0.9900。

3. 精密度

3.1分析内精密度:试剂盒质控品测定结果的变异系数（CV）应不大于15.0%。

3.2批间精密度:在三个不同批次产品之间，质控品测定结果的变异系数（CV）应不大于15.0%

4. 最-低检出限:最-低检测浓度小于0.1 pg/mL。

5. 质控品测定值: 每次检测结果均应在允许范围内。

样本要求

  样本类型和采集

以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠氮钠做为防腐剂。

1、细胞培养上清：4000rpm条件下离心20min，去除细胞颗粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反复冻融。

2、血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，4000rpm条件下离心20min，小心地分离出血清，保存在- 20℃以下，避免反复冻融。

3、血浆：肝素，EDTA，或柠檬酸钠作为抗凝剂。在4000rpm条件下，离心20分钟取上清，血浆保存在-20℃以下，避免反复冻融。

4、组织：用预冷的PBS (0.01 M,pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1: 9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9 mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎或反复冻融。最后将匀浆液5000×g离心 5-10分钟，取上清检测。