0.4%台盼蓝染色液一种阴离子型偶氮染料

0.4%台盼蓝染色液一种阴离子型偶氮染料

0.4%台盼蓝溶液是一种阴离子型偶氮染料，其核心功能是通过染料排斥试验区分活细胞与死细胞。

作用机制：活细胞的细胞膜完整，具有选择透过性，能排斥台盼蓝分子；而死细胞或膜受损细胞的细胞膜通透性增加，台盼蓝可进入细胞内，与蛋白质结合使细胞呈现蓝色。

浓度标准：0.4%为常规浓度，适用于大多数哺乳动物细胞的活力检测，过高浓度可能导致背景染色干扰，过低则影响死细胞着色效果。

注意事项

时间控制：染色时间过长（>10分钟）可能导致活细胞膜通透性改变，误染为死细胞。

背景干扰：台盼蓝可结合血清蛋白，导致高背景染色。建议离心后用非蛋白培养基或PBS重悬细胞。

荧光淬灭：台盼蓝可能淬灭细胞表面或内部的荧光信号，需与荧光染色实验错开进行。

个人防护：台盼蓝具有潜在致癌性，操作时需穿实验服、戴手套和口罩。

染色步骤（仅供参考）

悬浮细胞：

离心收集细胞，PBS洗涤2次。

取10μL细胞悬液与10μL台盼蓝溶液混合，吹打均匀。

吸取少量混合液，注入血球计数板盖片边缘，使液体充满计数室。

倒置显微镜下计数：活细胞无色，死细胞蓝色。

贴壁细胞：

弃培养基，PBS洗涤后加入胰蛋白酶消化。

离心收集细胞，PBS洗涤后重悬于台盼蓝工作液，室温孵育5分钟。

离心弃上清，PBS洗涤后重悬，显微镜计数。