低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测试盒的样本处理

低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测试盒的样本处理

（直接法 分光光度计法）

一、试剂组成及配制:

二、测定步骤：

1、样本处理:

①、血清(浆)：直接测定，如超过线性范围用生理盐水稀

释后测定。

②、培养液样本：吸取培养液，1000 转/分钟，离心 10

分钟，取上清测定。

[注]：一般建议细胞密度在 100 万个/mL 以上。

③、组织样本：准确称取组织重量,按重量(g)：体积

(mL)=1：9 的比例，加入 9 倍体积的匀浆

介质，冰水浴条件下机械匀浆，2500 转/

分，离心 10 分钟，取上清液待测。

[注]:1、如组织样本为非高脂样本，匀浆介质统一用磷酸

盐缓冲液(0.1mol/L pH 7.4)或生理盐水进行提取。

2、如组织样本为高脂样本或部分为高脂样本，匀浆

介质可统一用无水乙醇进行提取。

④、细胞样本：

A、细胞收集:将制备好的细胞悬液取出，1000 转/

分，离心 10 分钟，弃上清液，留细胞沉淀；用

等渗缓冲液（推荐 0.1mol/L 、pH7～7.4 磷酸盐

缓冲液）清洗 1～2 次，同样 1000 转/分，离心

10 分钟，弃上清液，留细胞沉淀；

B、细胞破碎:加入 0.2～0.3mL 的匀浆介质（推荐

0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸盐缓冲液或生理盐水）

进行匀浆，冰水浴条件下超声破碎(功率：300W，

3～5 秒/次，间隔 30 秒，重复 3～5 次)或手动匀

浆，制备好的匀浆液不离心直接测定。也可采

用裂解液裂解(推荐 TritonX-100，1～2%，裂解

30～40 分钟)，裂解好的液体不离心直接测定。

[注]：一般建议细胞密度在 100 万个/mL 以上。破碎好的

液体可显微镜观察细胞是否破碎

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