潮霉素B溶液的相关知识

  潮霉素B（Hygromycin B）是由吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成，从而杀死原核（如细菌）、真核（如酵母菌，真菌）和高等哺乳动物真核细胞。
大肠杆菌（ Escherichia coli.）来源的潮霉素抗性基因（hyg或hph），编码潮霉素B磷酸转移酶，将潮霉素B转化成不具有生物活性的磷酸化产物，从而起到解毒作用。针对这一原理，潮霉素B是一种非常有用的选择性标记，用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。另外，由于作用模式的差异，常与G418 (Cat：G8161)，Zeocin（Cat：Z8020）和Blasticidin S（Cat：B9300）联合使用进行双抗性阳性细胞株的选择。潮霉素B还能用作抗病毒剂，因其选择性渗透进入病毒感染增强通透性的细胞，且具有抑制翻译的功效。还可混合入动物饲料中起到驱虫功能。

潮霉素B的应用
  1.筛选和维持培养稳定转染Hph 载体的原核细胞或真核细胞（植物细胞和哺乳动物细胞）；
  2.由于作用模式的差异，常与G418 （GeneticinTM），Zeocin™和blasticidin S联合使用，筛选稳定转染两个不同载体的细胞株；
  3.抗病毒剂，由于潮霉素B选择性渗透进入病毒感染增强通透性的细胞，而且具有抑制翻译的功效；
  4.作为驱虫药加入动物饲料；
  5.双抗性稳定转染细胞筛选的抗生素作用机制及抗性
  6.抗生素抗性机制抗性基因哺乳动物筛选浓度
   i.潮霉素B干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读Hph 200~500μg/mL；
   ii.G418干扰80S核糖体功能和抑制蛋白合成Tn5/Tn60 1100~1000μg/mL；
   iii.Zeocin掺入或者切割DNA引起细胞死亡Sh ble 50~100μg/mL；
   iv.blasticidin S核糖体上抑制肽键形成Bsd/BSD 3~50μg/mL。
  7.罗氏潮霉素B应用浓度
   潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化。使用浓度为50-1000 μg/mL，优浓度需要杀灭曲线来确定。
   i.哺乳动物细胞·200-500 μg/mL；
   ii.细菌/植物细胞·100-300 μg/mL；
   iii.真菌·300-1000μg/mL。

注意事项

1） 潮霉素B的抗性基因（hyg或hph）除了来自E. Coli.之外，还发现于其他的菌株，包括Streptomyces hygroscopicus和Klebsiella pneumoniae。

2） 本品为有毒化合物，避免与皮肤和眼睛接触，请小心操作。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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